量子产率(QY)测试准确性的分析
量子产率测试是一个精准性的测试。简单来说,量子产率就是通过空白(Reference)和样品(Sample)的发射光谱,计算相应的峰面积得到。
量子产率测试的唯一要求就是准确,测试的每一个步骤都需要量化。测试过程中的每一个环节,每一个细节,可能对结果的都会有重大的影响。
本文从量子产率的公式角度,来分析影响量子产率准确性的影响因子。
当然,要得到准确的量子产率测试,严格按照操作步骤来测试,是最基本的要求。如果有对测试结果有疑虑,如果掌握需要详细的操作步骤,可以联系当地的售后工程师或者预约相关的培训。
一、SA
空白的清洁程度直接反应出来的是SA这个因子的大小。
SA的大小,是激发光穿透空白(液体)或者从空白上散射出来进入检测器的信号值。
要保证空白的绝对洁净度。
对于固体来说,聚四氟乙烯的空白板、空白薄膜片或者其他可以使用的空白物质,可以提前浸泡、清洗。
对于液体来说,要使用同一批次的比色皿,购买时可以是一对,也可以使用同一比色皿来测试空白和样品。
对于量子产率高的样品(特别是90%以上),如果空白有污染,SA会变小,导致公式的分母变小,很有可能得到超过100%的结果。
量子产率测得过高,可能是空白有吸收,导致SA偏小。
二、SB
SB是样品的散射信号。SB的大小受样品环境的影响。比如粉末池外表不干净,或者粉末没有铺满,粉末池底部裸露出来,增加了吸收,减小了SB值。
薄膜样品,薄膜片的吸收影响需要进行讨论。液体样品比色皿的洁净度也是关键。
如果样品是混合物,要考虑非测试物质吸收的影响。
对于SB的值,更多的是考虑散射差(SA-SB)的大小。空白对于样品一定要有对照性。包括了材质、样品溶液、聚焦甚至样品的外形,都需要具有对比性。
如果SA和SB两个峰相近,甚至重合,导致(SA-SB)较小,甚至在仪器的误差范围内,测试出来的量子产率值误差较大。遇到这样情况,需要考虑增加狭缝,散射和发射分开测试。
三、EA
EA是荧光背景基线。一般接近于检测器的噪声。但如果积分球或者样品池有污染,背景基线有明显的荧光峰值,测出的QY结果肯定不能接受。
四、EB
EB是样品的信号。
液体样品吸光度要小于0.1。这个吸光度是在激发波长处的吸光度,并且是溶液中物质的吸光度,而不是溶液的整体吸光度。
EB的影响,主要是考虑(EB-EA)的数值,如果太小,也就是发光弱,最后结果的误差也会增加。这种情况,需要考虑提高扫描精度,甚至需要使用散射和发射分开做的方法,通过增大狭缝(散射峰使用衰减片)减少最终值误差。
五、积分球的清洁度
如果积分球污染,对SA、SB、EA、EB四个峰都会有影响,而且影响没有规律性。积分球污染,可能会吸收一部分散射光,导致SA和SB减小;可能会吸收样品的荧光,导致EA减少;也有可能会直接产生新的信号,影响EA和EB。积分球污染是绝对要避免的。
建议为积分球准备一个洗耳球,用来吹扫落入的灰尘。固体槽、石英盖、比色皿都需要即时清洗或者浸泡,固/液体支架有必要也可以拆下清洗(FS5的固体支架除外)粉末装样时,注意静电导致的粉末洒落;测试液体,不宜过满,防止溢出。可以准备一个紫外灯,用来检查积分球和空白板、固体槽是否有污染。如果积分球不幸污染,建议联系爱丁堡售后团队,云顶国际提供清洗和更换内胆两种服务。
量子产率值要做到绝对的准确,看似简单,其实并不容易;对于一些样品来说,可能是一个艰巨的工程。量子产率准确性的影响因素也不仅仅是上面描述的。
云顶国际建议测试人员要理解测试操作每一步的意义,这样才能够有效评判测试结果的准确性。
各位客户如果遇到特殊的问题,欢迎和爱丁堡的售后团队讨论。